7 resultados para Intestinos Inflamação Teses
em Universidade de Lisboa - Repositório Aberto
Resumo:
Tese de doutoramento, Cincias Biomdicas (Biologia Celular e Molecular), Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2014
Resumo:
Tese de mestrado. Biologia (Biologia Evolutiva e do Desenvolvimento). Universidade de Lisboa, Faculdade de Cincias, 2014
Resumo:
Tese de doutoramento, Farmcia (Tecnologia Farmacutica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmcia, 2014
Resumo:
Os nanomateriais so estruturas com uma ou mais dimenses inferiores a 100 nanmetros. Devido sua pequena dimenso, as nanopartculas apresentam atributos nicos, tais como a sua elevada rea superficial relativamente sua massa, reactividade ou fora tnsil. Estas caractersticas influenciam grandemente algumas das propriedades dos nanomateriais, como a sua hidrofobicidade, carga ou toxicidade. As propriedades das nanopartculas tornam-nas tambm muito teis para o Homem, sendo aplicadas em medicina, farmcia, electrnica, cosmtica, vesturio e biotecnologia, entre outras. O aumento de produo e utilizao de nanomateriais tem vindo a aumentar tambm a possibilidade de exposio humana a este tipo de partculas, levando a preocupaes relativas ao risco de toxicidade aguda ou crnica. A exposio humana pode ocorrer por diversas vias, sendo as mais relevantes a via inalatria, ingesto ou contacto com a pele. Dependendo do material e do rgo-alvo, a exposio a nanomateriais pode conduzir a diferentes consequncias biolgicas: a nvel dos rgos, os nanomateriais podem levar a inflamação ou a supresso do sistema imunitrio e, a nvel celular e molecular, a perturbaes na estrutura e integridade do genoma, assim como a interaces com molculas biolgicas e inibio da actividade proteica, entre outras consequncias. Um dos nanomateriais mais utilizados so os nanotubos de carbono. Estes so constitudos por grafite cilndrica disposta numa nica camada (designados nanotubos de carbono de parede simples) ou em vrias (nanotubos de carbono de parede mltipla). Os nanotubos de carbono apresentam propriedades como resistncia e condutividade que os tornam muito teis em aplicaes como aparelhos electrnicos, vesturio ou biomedicina; cada vez mais, portanto, se torna provvel a exposio ocupacional ou ambiental a este material. A semelhana estrutural destas partculas com fibras de amianto conduziu a questes relativas sua segurana, pelo que j foram elaborados diversos estudos relativos aos seus efeitos biolgicos. Alguns trabalhos sugerem que os nanotubos de carbono tm a capacidade de produzir toxicidade associada a leses fsicas, produo de danos oxidativos por interaco com mecanismos celulares, ou a morte celular. Outros trabalhos defendem que estas partculas no causam toxicidade relevante. O projecto de dimenso europeia NANoREG surgiu da necessidade de ser desenvolvida legislao e regulamentao apoiadas em conhecimento cientfico e adequadas produo e ao uso actual de nanomateriais. Este trabalho teve como objectivos principais a determinao do potencial cito- e genotxico de um conjunto de nanotubos de carbono de parede mltipla (designados NM-400 a NM-403), e a consequente tentativa de associar este potencial s caractersticas fsico-qumicas dos nanomateriais. Com este objectivo, a exposio por via inalatria foi analisada, pelo uso de duas linhas celulares in vitro provenientes de tecidos do tracto respiratrio: epitlio pulmonar (clulas A549) e epitlio brnquico (clulas BEAS-2B). A citotoxicidade dos nanotubos de carbono foi analisada com base em trs parmetros. Em primeiro lugar, as clulas foram contadas aps a exposio aos nanomateriais utilizando o corante azul de tripanao para excluir as clulas inviveis; a contagem foi realizada 3 e 24 horas aps a exposio das clulas aos nanotubos. Os resultados deste ensaio apontam para a ausncia de citotoxicidade aps a exposio mais curta, e dados inconsistentes aps a mais longa. Em segundo lugar, foi realizado o ensaio clonognico, que se baseia na capacidade das clulas de se dividirem aps a exposio ao agente em estudo. Este ensaio s foi realizado nas clulas A549 pois as BEAS-2B no permitem a formao de colnias. Os resultados apontam para uma citotoxicidade aps a exposio a todos os nanomateriais, cuja intensidade se relaciona directamente com o tamanho das partculas, assim como ao seu dimetro e rea de superfcie. Em terceiro lugar, foram calculados dois ndices de viabilidade no ensaio dos Microncleos, cujo objectivo avaliar se as clulas se dividiram durante a exposio aos nanomateriais em comparao com o controlo, e cujos resultados apresentam incoerncias em relao aos outros j referidos. Estes dados podem ser justificados pelas diferenas existentes entre os ensaios, como o tempo de exposio ou a densidade celular. Os efeitos genotxicos dos nanomateriais foram avaliados com recurso aos ensaios do cometa e dos microncleos. O primeiro detecta leses pequenas e reversveis nas cadeias de DNA, ao passo que o segundo detecta efeitos irreversveis ao nvel cromossmico, tais como quebras ou perdas de cromossomas. Os resultados do ensaio do cometa sugerem que nenhum dos nanomateriais testados genotxico, uma vez que em ambas as linhas celulares e em ambos os tempos de exposio, os resultados so negativos. O ensaio dos microncleos, por outro lado, aponta para existncia de genotoxicidade de dois dos nanomateriais (NM-401 e NM-402) nas clulas A549, mas no em clulas BEAS-2B. Uma possvel explicao para estes dados aparentemente contraditrios pode residir na hiptese de estes nanotubos de carbono serem compostos com efeitos aneugnicos, mas no clastognicos: o ensaio dos microncleos permite a deteco de ambos os mecanismos de aco, ao passo que o ensaio do cometa s revela a quebra de cadeias de DNA. Outra justificao para os resultados a possvel influncia da perda de viabilidade das clulas analisadas. Com base nos dados do ensaio clonognico, estas partculas apresentam elevada citotoxicidade, pelo que os resultados dos ensaios de genotoxicidade, em particular do Ensaio do Cometa, podero ser afectados por estes efeitos. O meio de cultura usado para expor as clulas aos nanomateriais tambm um parmetro muito relevante na sua toxicidade. Neste trabalho, foram usados meios de cultura com protenas, que podem ser adsorvidas pelas partculas e formar uma corona em seu redor; este processo pode alterar propriedades importantes dos nanomateriais, entre os quais o seu potencial efeito biolgico. Tambm o mtodo usado para conseguir uma disperso homognea de nanomateriais pode conduzir a diferenas nos resultados dos ensaios de toxicidade. Neste estudo, foram observados alguns problemas relativos perda de homogeneidade das disperses de nanotubos de carbono, o que pode ter conduzido a que as clulas fossem expostas a massas de partculas de grandes dimenses conjuntamente com partculas individualizadas. O perodo durante o qual as clulas so expostas ao nanomaterial tambm um aspecto essencial na produo de efeitos txicos. Resumindo, este projecto forneceu informaes relativas toxicidade dos nanotubos de carbono que, complementadas pelas concluses dos restantes parceiros do projecto europeu, podero contribuir significativamente para a avaliao de risco e criao de legislao relativamente utilizao de nanomateriais. Na linha celular BEAS-2B, nenhum destes nanomateriais parece produzir efeitos txicos, quer a nvel de clula, quer a nvel de genoma, nas condies experimentais utilizadas. Nas clulas A549, por outro lado, os trs nanomateriais testados parecem ser acentuadamente citotxicos, e dois deles (NM-401 e NM-402) so tambm genotxicos. Em relao a perspectivas futuras, pode-se concluir que nem todos os ensaios de toxicidade existentes actualmente so adequados anlise de nanopartculas, pelo que novas metodologias devem ser desenvolvidas e complementadas por ensaios in vivo. Todos os estudos envolvendo nanomateriais devero tambm descrever as caractersticas fsico-qumicas dos materiais usados, de forma a se poderem comparar os resultados com os de outros trabalhos.
Resumo:
Tese de doutoramento, Cincias Biomdicas (Biologia Celular e Molecular), Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2015
Resumo:
Tese de mestrado. Oncobiologia, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2015
Resumo:
Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2014
